El extracto acuoso de Cymbopogon citratus protege al ADN plasmídico del daño inducido por radiación UVC / Cymbopogon citratus aqueous extract protects plasmid DNA from UVC-induced damage

Objetivo: Evaluar el efecto protector del extracto acuoso de Cymbopogon citratus (DC) Stapf, ante el daño inducido por las radiaciones UVC. Material y Métodos: Para evaluar si el extracto acuoso de C. citratus era capaz de inducir roturas de cadenas en el ADN, moléculas de plásmido pBluescript SK II fueron tratadas con diferentes concentraciones del extracto (0,01 - 4,0 mg/mL), en los tiempos de exposición: 30, 60 y 90 min. El efecto fotoprotector fue evaluado aplicando el extracto vegetal antes, durante, y después de la irradiación del ADN plasmídico con 200 J/m2 de UVC. La actividad enzimática de T4 endonucleasa V fue empleada para detectar formación de CPDs. Las formas superenrollada y relajada de las moléculas de plásmido fueron separadas electroforéticamente en gel de agarosa. Adicionalmente, se midió la transmitancia del extracto acuoso a la DO de 254 nm. Resultados: Ninguna de las concentraciones evaluadas resultó genotóxica con 30 min de tratamiento. Las concentraciones ≥ 2 mg/mL indujeron roturas de cadenas a los 90 min de incubación. El extracto de C. citratus a concentraciones ≥ 0,5 mg/mL protegió al ADN frente a las radiaciones UVC. Conclusiones: En nuestras condiciones experimentales, el extracto acuoso de C. citratus protege al ADN frente a la genotoxicidad inducida por la luz UVC, previniendo la generación de CPDs, pero no es capaz de eliminarlas una vez formadas

Aim: to evaluate the photoprotective effect of aqueous extract of Cymbopogon citratus (DC) Stapf against UVC-induced damage to ADN. Material and methods: In the experimental procedure, samples of plasmid pBluescript SK II solutions were exposed to C. citratus aqueous extract in 0.01-4.0 mg/mL concentrations during 30, 60 and 90 min. In order to evaluate the photoprotective effect, the vegetal extract was applied before, during and after UVC radiation at 200 J/m2 doses. DNA repair enzymes T4 endonuclease V was employed in order to discriminate CPDs damage. Then, supercoiled and relaxed forms of DNA were separated after electrophoretic migration in agarose gels. Also aqueous extract transmittance was measure at 254 nm OD. Results: None of the concentrations tested were genotoxic in 30 min of exposition. Concentrations ≥ 2 mg/mL induced strand breaks at 90 min of incubation. The C. citratus extract at concentrations ≥ 0.5 mg/ mL protect DNA in front of UVC radiation. Conclusions: In our experimental conditions, C. citratus extract protects DNA from the genotoxicity induced by light UVC, preventing the CPDs generation, but is not able to eliminate DNA damage once formed

Genotoxicidade in vitro das frações orgânica e solúvel em água de material particulado de ar em três locais do Estado de São Paulo / Genotoxicity in vitro of organic and soluble water fractions of airborne particulate matter in three sites of São Paulo State

O aumento na poluição ambiental é na atualidade uma das grandes preocupações em nível mundial. Especificamente, a poluição atmosférica por material particulado tem demostrado ser um fator determinante no desenvolvimento de doenças cardiopulmonares e câncer de pulmão nas populações expostas. O material particulado é constituído por uma mistura complexa de compostos orgânicos e inorgânicos, muitos dos quais possuem potencial mutagênico e genotóxico. As características destes compostos variam em função da suas propriedades físicas, químicas e em razão das condições meteorológicas prevalecentes. A maior parte dos estudos tem se focado em avaliar o potencial genotóxico da fração orgânica do material particulado e poucos estudos têm explorado a fração solúvel em água e a contribuição diferencial das diversas espécies químicas presentes nesta fração para o dano genotóxico. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos mutagênicos e genotóxicos in vitro da fração orgânica e da fração solúvel em água de material particulado (MP10) coletado em três locais diferentes do estado de São Paulo e estabelecer a relação entre a composição química e o efeito biológico observado. Para isto, realizou­-se a extração orgânica e solúvel em água de 12 amostras de MP10. A mutagenicidade e genotoxicidade foram avaliadas usando o ensaio de Salmonella/microssoma e o teste de micronúcleos (MN) em células A549 e 16 hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos (HPAs) e 15 metais hidrossolúveis presentes nas amostras foram determinados quimicamente. Adicionalmente, foi determinada a metodologia de extração da fracção solúvel em água e se avaliou a estabilidade química e biológica desta fração. Os resultados indicam que a extração assistida por micro-ondas é um método eficiente para a extração da fração solúvel em agua do MP e que um tempo superior a 60 dias de armazenamento e congelamento deste tipo de extrato tem um efeito significativo sobre os resultados analíticos e a resposta biológica. Foi demonstrado ainda que as duas frações de MP estudadas são responsáveis pela indução do dano ao DNA e que não existe uma relação direta entre a concentração de MP e o efeito genotóxico observado, confirmando a importância do uso de bioensaios na avaliação da genotoxicidade de misturas complexas como o MP. Os HPAs prevalecentes nas amostras de PM10 foram fluorantene e benzo(ghi)perileno. Nos extratos solúveis em água, as maiores concentrações de metais foram determinadas para zinco, ferro e cobre. Confirmou-se que a indução de MN e o ensaio de Salmonella/microssoma representam uma poderosa ferramenta na avaliação da polução atmosférica e que as análises químicas por si só não são suficientes para a proteção e predição dos efeitos biológicos em populações expostas

The increase of environmental pollution is today one a major concern worldwide. Specifically, air pollution by particulate matter has been shown to be a determining factor in the development of cardiopulmonary disease and lung cancer in exposed populations. The particulate material consists of a complex mixture of organic and inorganic compounds, many of which have mutagenic and genotoxic activity. The characteristics of these compounds vary according to their physical and chemical properties and also to the prevailing weather conditions. Most studies have focused on evaluating the genotoxic potential of the organic fraction of particulate material, but few studies have explored the water­-soluble fraction, and the differential contributions of different chemical species present in this fraction to genotoxic damage. The aim of this study was to evaluate the in vitro mutagenic and genotoxic effects of organic and water-soluble fractions of 12 samples of particulate matter (PM10) collected at three different sites in the state of São Paulo and establish the relationship between the chemical composition and the biological effect observed. The mutagenicity and genotoxicity were evaluated using the Salmonella/microssome test and the micronucleus assay (MN) in A549 cells and 16 Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs) and 15 water-soluble metals present in the samples were chemically determined. Additionally, the extraction method of water- soluble fraction was determined and the chemical and biological stability of this fraction evaluated. The results indicate that the microwave­-assisted extraction is an efficient method for the extraction of the water-soluble compounds of PM and that the freezing and storage of the extract over 60 days has a significant effect on the mutagenic and analytical results of PM samples. It was demonstrated that the two PM fractions studied are responsible for the induction of DNA damage and that there is no direct relationship between the MP concentration and the genotoxic effect observed, confirming the importance of using bioassays in the genotoxicity evaluation of complex mixtures as PM. The PAHs prevailing in our samples were fluoranthene and benzo(ghi)perylene. In the water-soluble extracts, highest concentrations of the elements studied were found for zinc, iron, and copper in the three places of sampling. We confirmed that MN induction and Salmonella/microsome assay represents a powerful tool to evaluate the atmospheric air pollution and that the total concentration of PM and the chemical analyses alone would not be sufficient for the prognosis of biological effects in exposed populations

Genotoxicidad de los nanomateriales, grandes discrepancias y desafíos / Genotoxicity of nanomaterials, discrepancies and challenges

La nanotecnología es el estudio, diseño, creación, síntesis, manipulación y aplicación de materiales a través del control de la materia a escala nanométrica, entre 1 a 100 nanómetros. Se considera que la nanoteconología está revolucionando nuestro mundo. Los nanomateriales son ampliamente utilizados en diferentes campos por sus propiedades únicas pero también pueden causar efectos adversos tanto para la salud humana como para el ambiente, por lo que es necesario conocer los riesgos y los factores que incrementan estos efectos adversos. En esta revisión abordamos los nanomateriales y sus tipos, los aspectos tóxicos con énfasis en el efecto genotóxico, ya que por sus implicaciones de daños en el ADN pueden iniciar y promover la carcinogénesis, o afectar la fertilidad, ciertas consideraciones que deben tomarse en cuenta en el momento de la evaluación genotóxica de los NMs. Aunque existe cierta evidencia de alteraciones al exponer las células a los nanomateriales, todavía existen deficiencias e inconsistencias en la literatura y en las normativas para conocer las características físico-químicas de los nanomateriales, cómo actúan, y sus posibles cambios con el tiempo (AU)

Nanotechnology is the study, design, creation, synthesis, manipulation and application of materials through the control of matter at the nanometer scale, between 1-100 nanometers. Nanotechnology is revolutionizing our world. Nanomaterials are widely used in various fields thanks to their unique properties. However, nanomaterials can also result in adverse health effects and the environment, it is necessary to know the risks and factors that increase these effects. In this review we focus on nanomaterials and their types, the toxic aspects of nanoparticles; with emphasis on the genotoxic effects and DNA damage that can initiate or promote carcinogenesis or affect fertility as well as the guidelines for the application of genotoxicity tests. Although there is some evidence of changes that occur when cells are exposed to nanomaterials, there is still a dearth of consistent results in the literature and in regulatory documents in terms of physicochemical characteristics of nanomaterials, their mechanisms, and exposure (AU)

Morphoanatomic characterization of the stem and the leaf of Tabernaemontana catharinensis A. DC (Apocynaceae) and antimutagenic activity of its leaves / Caracterização morfoanatômica do caule e da folha de Tabernaemontana catharinensis A. DC (Apocynaceae) e atividade antimutagênica de suas folhas

ABSTRACT Tabernaemontana catharinensis A. DC (Apocynaceae) is used as a medicinal plant by the population. In order to contribute to the safe use of the plant as herbal medicine, this study aimed to morphoanatomically characterize the aereal vegetative organs of T. catharinensis and to evaluate the leaves’ mutagenic and antimutagenic activities. Histological blades of leaves and stem of T. catharinensis were performed; the methionine system (methG1) and Aspergillusnidulans conidia germination analysis were employed for mutagenic and antimutagenic evaluation. The morphoanatomic analysis did not show trichomes in the stem, petiole and leaf. Besides, it was observed both the presence of bi-collateral bundles - except in the foliar apex where the bundles were from the collateral type - as well as anamphistomatic leaf with paracyte stomata and sub-epidermal layer in the region of the leaf edges. The mutagenicity/antimutagenicity trial indicated a significant decrease of mutation frequency in comparison with the control group and showed that the T. catharinensis had antimutagenic activity within the type, time and form of treatment. Since the germination test showed that the conidia germination was accelerated from the bud phase, activities at the cell cycle level and polarized growth proved to be possible. The morphoanatomic analysis of the leaf and stem associated with the mutagenic and antimutagenic analyses contributes to the safe use of the plant by humans and also for the quality control of a possible phytotherapeutic drug.

RESUMO Tabernaemontana catharinensis A. DC (Apocynaceae) é utilizada como planta medicinal pela população. A fim de contribuir para o uso seguro da planta como medicinal, este trabalho teve como objetivo caracterizar morfoanatomicamente os órgãos vegetativos aéreos de T. catharinensis e avaliar a atividade mutagênica e antimutagênica de suas folhas. Foram realizados cortes histológicos da folha e do caule de T. catharinensis e, para a avaliação mutagênica e antimutagênica, foi utilizado o sistema metionina (methG1) e análise da germinação de conídios em Aspergillus nidulans. A análise morfoanatômica evidenciou a ausência de tricomas no caule, pecíolo e folha; presença de feixes bicolaterais, com exceção no ápice foliar cujos feixes são do tipo colateral; folha anfiestomática com estômatos paracíticos e camada subepidérmica na região do bordo foliar. O ensaio de mutagenicidade/antimutagenicidade mostrou uma diminuição significativa da frequência de mutação em relação ao controle, indicando que nesse tipo, tempo e forma de tratamento, T. catharinensis apresentou atividade antimutagênica. O ensaio de germinação evidenciou que houve aceleração da germinação dos conídios, a partir da fase de botão, indicando uma possível atuação em nível de ativação de ciclo celular e crescimento polarizado. A análise morfoanatômica da folha e do caule associados à análise mutagênica e antimutagênica, contribuem para o uso seguro da planta pela população e para o controle de qualidade de um possível fitoterápico.

Caracterización química del material particulado PM10 de la zona urbana de Cuenca- Ecuador e investigación de su genotoxicidad e inducción de estrés oxidativo en células epiteliales alveolares A549 / Chemical characterization and study of the genotoxicity and induction of oxidative stress of particulate material PM10 from the urban area of Cuenca - Ecuador

La exposición a partículas ambientales es un factor de riesgo que ocasiona daños en la salud humana, como trastornos respiratorios, cardiovasculares y cáncer. La toxicidad y el efecto inflamatorio de estas partículas están relacionados con su tamaño y características químicas. El objetivo de este estudio fue determinar las características químicas de la fracción hidrosoluble de Material Particulado PM10, recolectado en tres sitios de monitoreo de la ciudad de Cuenca-Ecuador, y evaluar su actividad genotóxica e inducción de especies reactivas de oxígeno (ROS) en la línea celular epitelial alveolar humana A-549. Las muestras fueron recolectadas empleando un equipo de bajo volumen. Las concentraciones de material particulado determinadas por análisis gravimétrico superaron en los tres puntos de estudio los 50 µg/m3, límite estipulado en la Legislación Ecuatoriana. En la caracterización de la solución acuosa se determinó la presencia de aniones (Cl-, NO3-, SO4-2) y metales pesados (Cr, Fe, Ni, Zn, Cu, Mn), mediante técnicas de cromatografía iónica y espectroscopía de absorción atómica respectivamente; SO4-2 y Fe presentaron las mayores concentraciones. Las células A-549 fueron expuestas a diferentes concentraciones (0,82; 1,25 y 1,63 m3/mL) de la fracción hidrosoluble de PM10, con la finalidad de observar el posible efecto genotóxico mediante el ensayo del cometa y la inducción de especies reactivas de oxígeno mediante fluorimetría. Finalmente se determinó que los extractos acuosolubles de PM10 inducen daño celular bajo (tipo I), e incrementan la producción de ROS en células A-549, lo que pudiera constituir un riesgo en la salud de la población expuesta (AU)

Exposure to environmental particles is a risk factor that causes damage to human health, such as respiratory and cardiovascular diseases and cancer. The toxicity and inflammatory effects of these particles is related to their size and chemical characteristics . The aim of this study was to determine the chemical characteristics of the aqueous fraction of Particulate Matter PM 10, collected in three monitoring sites Cuenca-Ecuador, a nd to evaluate their genotoxic activity and induction of reactive oxygen species (ROS) in human alveolar epithelial cell line A-549. Samples were collected using a low volume equipment. Particulate matter concentrations determined by gravimetric analysis in the three study points exceeded the 50ug/m3 limit stated in the Ecuadorian legislation. In the characterization of the aqueous solution the presence of anions (Cl-, NO3-, SO4-2) and heavy metals (Cr, Fe, Ni, Zn, Cu, Mn) was determined by ion chromatography techniques and atomic absorption spectroscopy, respectively; SO4-2 and Fe showed the highest concentrations. The A-549 cells were exposed to different concentrations (0.82, 1.25 and 1.63 m3 / mL) fraction of water-soluble PM10, in order to observe the possible genotoxic effect by the comet assay and the amount inducing reactive oxygen species by fluorimetry. It was finally determined that the aqueous -soluble extracts of PM10 induce cell damage under (type I), and increase the production of ROS in cells A-549, which could pose a risk to the health of the exposed population of the city of Cuenca (AU)

Aplicación de un sistema in silico múltiple para la priorización en la selección de compuestos antimaláricos / Multiple in silico genetic toxicity alerting tools for antimalarial compounds prioritization

Introducción: Como parte del compromiso de GSK en la reducción del fracaso en las fases de desarrollo clínico y preclínico, se ha implementado en las fases más tempranas de desarrollo una estrategia para evitar los problemas de genotoxicidad que son los que, en mayor manera, pueden obstaculizar la progresión a fases más avanzadas. El objetivo de este trabajo es aplicar la nueva estrategia de GSK para la priorización de compuestos que permita seleccionar aquellas estructuras con menor riesgo de genotoxicidad utilizando una combinación de herramientas computacionales que predice el resultado del test de Ames. Materiales y Métodos: Compuestos de la colección de GSK, activos en el screening fenotípico frente a P. falciparum, fueron utilizados en este estudio. Tres modelos, Derek Nexus (Lhasa Limited, Leeds, UK), Leadscope y un método de mecánica cuántica desarrollado internamente se utilizaron para las predicciones in silico. Resultados: la combinación de los tres modelos de predicción tuvo un porcentaje de éxito del 75% con sólo 1 falso positivo. Conclusiones: Moléculas con 2 o más alertas de genotoxicidad generadas por este sistema múltiple deberían ser despriorizadas o ensayadas experimentalmente cuanto antes para descartar su riesgo de genotoxicidad (AU)

Introduction: As part of the commitment of GSK in reducing attrition rate in clinical and preclinical stages, it has been set up in early stages of development (H2L, Lead Op) a candidate quality strategy to avoid genotoxicity liabilities that mainly can stop the progression of compound towards advanced stages. The aim of the study is to apply the new strategy in order to triage structures with less genotoxicity risk by means an in silico multiple system that predicts the outcome of Ames test. Material & Methods: Active compounds against P. falciparum phenotypic screening from GSK collection were used. Three different models: Derek Nexus (Lhasa Limited, Leeds, UK), Leadscope and a quantum mechanics method developed internally were used for in silico predictions. Results: The use of three models have an accurately success rate, greater than 75% with only 1 false positives. Conclusions: Those molecules that fire 2 or more genotoxicity alerts should be deprioritised or tested experimentally in Ames test to confirm or discharge the genotoxicity risk (AU)

Evaluación genotóxica del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet en el ensayo de aberraciones cromosómicas en ratones Balb/c / Genotoxic assessment of the Carapa guianensis Aublet seed oil extract in the chromosomal aberrations assay performed in Balb/c mice

Introducción: el extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet ha tenido diversos usos biomédicos. Recientemente fue evaluado este extracto, el cual manifestó grandes potencialidades como antioxidante en ensayos in vivo; pero poco se conoce de su efecto sobre el ADN en biomodelos experimentales. Objetivo: evaluar el potencial genotóxico del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis en el ensayo de aberraciones cromosómicas de células de la médula ósea de ratones Balb/c. Métodos: se formaron cinco grupos experimentales: un grupo placebo (Tween 65 al 2 por ciento), tres tratados con niveles de dosis del extracto (400, 1 000 y 2 000 mg/kg), administrados por vía oral durante 14 días; por último, un grupo control positivo tratado con ciclofosfamida, en dosis de 50 mg/kg por vía intraperitoneal 48 y 24 h antes de la eutanasia. Se administraron cinco animales/sexo/grupo. Después de los 14 días de administración se les efectuó la eutanasia por dislocación cervical y se les extrajo la médula ósea del fémur para proceder a realizar la técnica citogenética de aberraciones cromosómicas. Resultados: los resultados entre controles y tratados con el extracto no difirieron para los dos sexos en las variables índice mitótico, Gaps, células con poliploidías, número de células con aberraciones cromosómicas y cromatídicas y el porcentaje de células con aberraciones. Sin embargo, sí difirieron controles y tratados contra el grupo tratado con ciclofosfamida, lo que valida nuestros resultados. Conclusiones: el extracto oleoso de la semilla de la Carapa guianensis no posee potencialidades genotóxicas en la formación de aberraciones cromosómicas, sobre todo estructurales en células de la médula ósea de ratones Balb/c de ambos sexos(AU)

Introduction: the oil extract from Carapa guianensis seed has various biomedical applications. It was recently evaluated and revealed great potentialities as antioxidant in in vivo assays, but little is known about its effect on DNA in experimental biomodels. Objective: to evaluate the genotoxic potential of the oil extract from Carapa guianensis seed in the chromosomal aberration of the bone marrow cells test performed in Balb/c mice. Methods: five experimental groups were created: one placebo group (Tween 65, 2 percent), three treated with different extract doses (400, 1000 and 2000 mg/kg) orally administered for 14 days and one positive control group treated with cyclophosphamide at a dose of 50 mg/kg intraperitoneally at 48 and 24 h before euthanasia. Five animals per sex from each group were administered the set dose. After 14 days of treatment, the animals were euthanized through cervical dislocation and their femoral bone marrow was taken out to perform the cytogenetic chromosomal aberration technique. Results: the results between the control group and the groups treated with the extract did not differ between the two sexes in terms of the mitotic index variables, Gaps, polyploidy cells, number of cells with chromosome and chromatic aberrations and the percentage of aberration cells. However, the results of controls and of treated groups were different from those of the group treated with cyclophosphamide, which proved the validation of our results. Conclusions: the oil extract from Carapa guianensis seeds does not have genotoxic potential for the formation of chromosome aberrations, mainly structural, in Balb/c mice bone marrow of both sexes(AU)

Evaluación genotóxica del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet en el ensayo de aberraciones cromosómicas en ratones Balb/c / Genotoxic assessment of the Carapa guianensis Aublet seed oil extract in the chromosomal aberrations assay performed in Balb/c mice

Introducción: el extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet ha tenido diversos usos biomédicos. Recientemente fue evaluado este extracto, el cual manifestó grandes potencialidades como antioxidante en ensayos in vivo; pero poco se conoce de su efecto sobre el ADN en biomodelos experimentales. Objetivo: evaluar el potencial genotóxico del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis en el ensayo de aberraciones cromosómicas de células de la médula ósea de ratones Balb/c. Métodos: se formaron cinco grupos experimentales: un grupo placebo (Tween 65 al 2 por ciento), tres tratados con niveles de dosis del extracto (400, 1 000 y 2 000 mg/kg), administrados por vía oral durante 14 días; por último, un grupo control positivo tratado con ciclofosfamida, en dosis de 50 mg/kg por vía intraperitoneal 48 y 24 h antes de la eutanasia. Se administraron cinco animales/sexo/grupo. Después de los 14 días de administración se les efectuó la eutanasia por dislocación cervical y se les extrajo la médula ósea del fémur para proceder a realizar la técnica citogenética de aberraciones cromosómicas. Resultados: los resultados entre controles y tratados con el extracto no difirieron para los dos sexos en las variables índice mitótico, Gaps, células con poliploidías, número de células con aberraciones cromosómicas y cromatídicas y el porcentaje de células con aberraciones. Sin embargo, sí difirieron controles y tratados contra el grupo tratado con ciclofosfamida, lo que valida nuestros resultados. Conclusiones: el extracto oleoso de la semilla de la Carapa guianensis no posee potencialidades genotóxicas en la formación de aberraciones cromosómicas, sobre todo estructurales en células de la médula ósea de ratones Balb/c de ambos sexos(AU)

Introduction: the oil extract from Carapa guianensis seed has various biomedical applications. It was recently evaluated and revealed great potentialities as antioxidant in in vivo assays, but little is known about its effect on DNA in experimental biomodels. Objective: to evaluate the genotoxic potential of the oil extract from Carapa guianensis seed in the chromosomal aberration of the bone marrow cells test performed in Balb/c mice. Methods: five experimental groups were created: one placebo group (Tween 65, 2 percent), three treated with different extract doses (400, 1000 and 2000 mg/kg) orally administered for 14 days and one positive control group treated with cyclophosphamide at a dose of 50 mg/kg intraperitoneally at 48 and 24 h before euthanasia. Five animals per sex from each group were administered the set dose. After 14 days of treatment, the animals were euthanized through cervical dislocation and their femoral bone marrow was taken out to perform the cytogenetic chromosomal aberration technique. Results: the results between the control group and the groups treated with the extract did not differ between the two sexes in terms of the mitotic index variables, Gaps, polyploidy cells, number of cells with chromosome and chromatic aberrations and the percentage of aberration cells. However, the results of controls and of treated groups were different from those of the group treated with cyclophosphamide, which proved the validation of our results. Conclusions: the oil extract from Carapa guianensis seeds does not have genotoxic potential for the formation of chromosome aberrations, mainly structural, in Balb/c mice bone marrow of both sexes(AU)

Potencial genotóxico del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis Aublet para inducir anomalías en la morfología de la cabeza del espermatozoide / Genotoxic potencial of the Carapa guianensis Aublet seed oleaginous extract to induce abnormalities in sperm head morphology

Objetivo: La presente investigación se realizó con el objetivo de evaluar el potencial genotóxico del extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis para inducir anomalías en la morfología de la cabeza del espermatozoide en ratones machos Balb/c. Materiales y métodos: Se formaron 5 grupos experimentales: un grupo placebo (Tween 65 al 2%), 3 niveles de dosis del extracto (400, 1.000 y 2.000 mg/kg), administrados por vía oral durante 35 días, y por último un grupo control positivo tratado con ciclofosfamida (CF), en dosis de 50 mg/kg por vía intraperitoneal durante 5 días y 35 días de reposo después de la última administración con el mutágeno. Se distribuyeron 8 animales/grupo. Después de los 35 días de administración se eutanizaron por dislocación cervical y se extrajeron ambos epidídimos para ser procesados y evaluados según esta técnica citogenética. Resultados y discusión: Los resultados obtenidos entre controles y tratados con el extracto no difirieron en cuanto a la frecuencia de las diferentes anomalías de la cabeza del espermatozoide encontradas, y tampoco en la concentración espermática y de espermatozoides con gota citoplasmática. Sin embargo, sí difirieron controles y tratados contra el grupo tratado con CF, validando nuestros resultados. Se concluye que el extracto oleoso de la semilla de Carapa guianensis no posee potencialidades genotóxicas para inducir aumento en la frecuencia espontánea de la morfología de la cabeza del espermatozoide de ratones machos Balb/c (AU)

Objective: This study has aimed to evaluate the genotoxic potential of Carapa guianensis seed oil extract to induce sperm head abnormalities in Balb/c mice. Material and methods: Five experimental groups were formed: one placebo group (Tween 65, 2%), three extract dose levels (400, 1000 and 2000 mg/kg) administered orally for 35 days and one positive control group treated with cyclophosphamide (CP) at a dose of 50 mg/kg via intraperitoneally for 5 consecutive days and then 35 days of rest after the last administration with the mutagen. Were distributed 8 animals per group. The animals were euthanized by cervical dislocation 35 days after the administration and the epididymis was extracted to proceed with the sperm head morphology assay. Results and discussion: There were no significant differences in the results between the controls and those treated with the extract regarding frequency of the different sperm head anomalies or in the spermatic concentration and sperms with cytoplasmic drop. However, a difference was found between the controls and treated versus the CP treated group, validating our results. We have concluded that the oleaginous extract of Carapa guianensis seeds does not have genotoxic potentialities to induce an increase in the spontaneous frequency in the sperm head morphology of male Balb/c mice (AU)

Genotoxicidad sobre linfocitos humanos expuestos a PM10 de tres sitios del Valle de Aburrá (Antioquia) / Genotoxicity in human lymphocytes exposed to PM10 from three sites in the Valle de Aburrá (Antioquia)

Objetivo Evaluar la calidad del aire en tres sitios del Valle de Aburrá (Antioquia) a través de la determinación de la genotoxicidad del PM10 en linfocitos humanos. Métodos A partir del valor de referencia de PM10 para Colombia (50 μg/m3/año) se eligieron tres sitios del Valle de Aburrá con diferente promedio de PM10, Barbosa con 25 μg/m3, Corantioquia con 44 μg/m3y Facultad de Minas con 91 μg/m3. Los filtros de PM10 expuestos por 24 horas, se analizaron en la épocas de lluvia, transición y seca entre Julio de 2011 y abril de 2012. Con el extracto orgánico obtenido en cada filtro se trataron linfocitos humanos para evaluar in vitro el daño en el ADN por medio del ensayo Cometa Alcalino. Resultados Todos los sitios indujeron genotóxicidad altamente significativa (p< 0.001) respecto al control negativo, presentando el mayor daño durante la época de transición. Se observaron diferencias significativas (p<0.05) en la genotoxicidad inducida por el PM10 entre los tres sitios evaluados. Conclusiones Aunque los valores de PM10 reportados para Barbosa y Corantioquia fueron inferiores al nivel máximo permisible, se encontró actividad genotóxica del PM10 proveniente tanto de ellos como de Facultad de Minas cuyo valor de PM10 es superior a la norma. Estos resultados indican que únicamente el monitoreo fisicoquímico del material particulado es insuficiente para evaluar el riesgo relativo sobre la población expuesta. En consecuencia, estos estudios deben ser complementados con biomarcadores de genotoxicidad como el ensayo cometa.(AU)

Objective Assessing air quality by determining PM10 genotoxicity in human lymphocytes at three locations in the Valle de Aburrá (Antioquia department). Methods Three sites were chosen in the Valle de Aburrá (Barbosa, Corantioquia and the School of Mines) using Colombian reference (50 g/m3) and PM10content values, having annual low (25 mg /m3), medium (44 ug/m3) and high PM10 average (91 ug/m3). PM10filters were analyzed during three different seasons between 2011 and 2012: rainy, transitional and dry. Human lymphocytes were treated with the organic extract obtained from each filter to evaluate DNA damage using an alkaline comet assay. Results Genotoxicity was found to be highly significant (p<0.001) in all cases, compared to the negative control. The highest damage (six times) was seen in material from the School of Mines and during the transitional period. Differences were found between material from Barbosa and Corantioquia regarding that from the School of Mines concerning the induction of damage. Conclusions Although the PM10 values reported for Barbosa and Corantioquia were below the maximum permitted level, genotoxic activity was found for PM10from both sites as well as for the School of Mines. These results show that physical-chemical monitoring of particulate matter is not enough for assessing the exposed population's relative risk. Such analysis should thus be accompanied by using genotoxicity biomarkers, such as the comet assay.(AU)

Respuesta de ratones Balb/c frente a ciclofosfamida y bleomicina en el ensayo cometa alcalino de linfocitos de sangre periférica / Balb/c mice response against cyclophosphamide and bleomycin in the alkaline comet assay of peripheral blood lymphocytes

En este artículo se evaluó el efecto mutágenico de la ciclofosfamida y bleomicina, con el objetivo de armonizar el número de exposiciones al ser utilizadas como controles positivos en ensayos in vivo de genotoxicidad, mediante el ensayo cometa alcalino. Se realizó en linfocitos de sangre periférica, utilizando 10 ratones/grupo/sexo de la línea Balb/c como biomodelo experimental. Fueron formados 5 grupos experimentales/sexo, el primero administrado con NaCl al 0,9% por vía intraperitoneal (i.p) como control negativo. El segundo y el tercero administrados con ciclofosfamida por vía i.p, con diseños de tratamientos diferentes en dosis de 50 mg/kg. El cuarto y quinto grupo fueron administrados con bleomicina por vía i.p, igualmente en dos diseños de tratamientos diferentes en dosis de 20 mg/kg. El mayor valor de inducción de daño se obtuvo con el uso de la ciclofosfamida y bleomicina, ambas en el diseño de administración de 48 y 24 horas antes de la eutanasia. Este estudio será aplicable a la evaluación de drogas que no han sido exploradas en el ámbito de la antigenotoxicidad y genotoxicidad in vivo. Además permitirá contar con un mayor conocimiento acerca de este ensayo, favoreciendo su validación (AU)

In this article were evaluated the mutagenic effect of cyclophosphamide and bleomycin, with the objective of harmonizing the number of exhibitions when being used as positive controls on in vivo genotoxicity assay, by means of alkaline comet assay. It was carried out in peripheral blood lymphocytes, using 10 mice/group/sex of the Balb/c line as experimental biomodel. We were formed 5 experimental groups per sex. The first group was administered with NaCl 0,9 % by intraperitoneal (i.p) route. The second and third groups were administered with cyclophosphamide by i.p route, with designs of different treatments at doses of 50 mg/kg. The fourth and fifth groups were administered with bleomycin by i.p route, equally in two designs of different treatments at doses of 20 mg/kg. The bigger inductions of damage were obtained with the use of the cyclophosphamide and bleomycin, both in the design of 48 and 24 hours administration before the euthanasia. This study will be applicable to the drugs evaluation that they have not been explored in to the in vivo antigenotoxicity and genotoxicity environment. It will also allow having a bigger knowledge about this assay, favoring their validation (AU)

XIX Congreso Español de Toxicología / No disponible

No disponible

Evaluación genotóxica del D-004, extracto del fruto de Roystonea regia, mediante el ensayo de la morfología de la cabeza del espermatozoide en ratas Sprague Dawley / Genotoxic evaluation of D-004 in the Sprague Dawley rats sperm morphology assay

El tratamiento oral con D-004, extracto lipídico del fruto de la palma real (Roystonea regia), ha mostrado prevenir la hiperplasia prostática (HP) inducida por testosterona y por fenilefrina en ratas, efectos relacionados con su capacidad de inhibir la actividad de la 5 -reductasa prostática y de antagonizar los adreno-receptores 1.Este estudio, como parte de los estudios de genotoxicidad del D-004,tuvo como objetivo determinar si el mismo aumenta la frecuencia de aparición de formas anómalas de la cabeza del espermatozoide en ratas. Para ello se utilizaron ratas Sprague Dawley machos incluidas en un estudio de toxicidad crónica, distribuidas aleatoriamente en 5grupos (8 ratas/grupo): 1 control negativo tratado con el vehículo, 3grupos tratados con D-004 (800, 1500 y 2000 mg/kg, respectivamente), y 1 control positivo (Ciclofosfamida, 50mg/kg).Los tratamientos (vehículo o D-004) se administraron por vía oral durante 12 meses, la Ciclofosfamida se administró por vía intraperitoneal 5 días consecutivos. No ocurrieron muertes ni se detectaron signos de toxicidad. Las concentraciones de espermatozoides, y las frecuencias de espermatozoides normales en los grupos tratados con D-004 fueron similares a los del control negativo, mientras que el grupo control positivo mostró menor concentración de espermatozoides y mayor frecuencia de espermatozoides anómalos que los controles negativos. En conclusión, el D-004 administrado durante varios períodos de espermatogénesis no presenta potencial genotóxico sobre las células germinales masculinas de ratas (AU)

Oral treatment with D-004, a lipid extract from the royal palm(Roystonea regia) fruits, has been shown to prevent prostate hyperplasia (PH) induced by testosterone and phenylephrine in rats through the D-004-mediated inhibition of prostate 5 –reductase activity and antagonism of -1 adrenoceptors. This study, as part of the studies of the genotoxic potential of D-004, was aimed to determine whether D-004 increases the frequency of abnormal forms of rat sperm-head morphology. For that, male Sprague Dawley rats included in a chronic toxicity study were used, which were randomly distributed into 5 groups (8 rats/group): 1 negative control treatedwith the vehicle, 3 D-004-treated groups (800, 1500 and 2000 mg/kg, respectively), and 1 positive control (Ciclophosphamide, 50mg/kg).Treatments (vehicle or D-004) were orally administered for 12months, while Ciclophosphamide was given by intraperitoneal route five days consecutive. There were no deaths and no toxicity signs were observed. Spermatozoid concentrations and the frequencies of normal spermatozoids in D-004 treated groups were similar to those of the negative controls, while the positive control had decreased spermatozoid concentrations and increased frequency of abnormals permatozoids compared with the negative controls. In conclusion,D-004 orally administered during several periods of spermatogenesis in rats did not show genotoxic potential on the male germinal cells (AU)

Efecto genotóxico de la glibenclamida, metformina y terapia combinada en la línea celular de ovario de hámster chino Cricetulus griseus CHO-K-1 / Genotoxic effect of glibenclamide, metformin and combinated therapy on chinese hamster's ovary cell line cricetulus griseus cho

INTRODUCCIÓN: Actualmente, el efecto genotóxico de los antidiabéticos orales es desconocido, motivo por el cual es necesario investigar el tema. MATERIAL Y MÉTODOS: Modelo experimental, para evaluar el efecto genotóxico de los antidiabéticos orales mediante el Test de Intercambio de Cromátides Hermanas (ICH) y el Test de Micronúcleos (MN). Se empleó como material células de la línea celular de ovario de hámster chino (CHO-Kl) Cricetulus griseus y tabletas de glibenclamida y metformina. Las células de la línea celular fueron cultivadas en Ham's F10 suplementado con 2 % estreptomicina-penicilina, 0,5 % L-glutamina y 10% suero bovino fetal (PBS) 20. Las células fueron agrupadas y tratadas con Glibenclamida 5 mg, Metformina 850 mg, Glibenclamida + Metformina 5/850 mg y el grupo control. Los resultados se valoraron en base al Test de Evaluación Genotóxica. RESULTADOS: Se observó un incremento significativo de ICH (p< 0.05) en el grupo de la terapia combinada (8.03 ± 0.17) con respecto al grupo control y a la metformina (6.91 ± 0.19; 6.94 ± 0.45) respectivamente; además se observó un incremento significativo de MN en el grupo de la terapia combinada de glibenclamida con metformina (14.44 ± 0.93), glibenclamida sola (10.18 ± 0.93) Ymetformina sola (7.10 ± 1.04) con respecto al grupo control (3.93 ± 0.46). CONCLUSIÓN: La glibenclamida más metformina produce efecto genotóxico evidenciado por medio de las pruebas ICH y el Test de MN.

INTRODUCTION: Actually, the genotoxic effect of the oral anti-diabetics is unknown, so its important to investigate about it. MATERIAL AND METHODS: We used the experimental design, in order to evaluate the existence of genotoxic effect of the oral antidiabetics by using Sister Chromatid Exchanges (SCE) and Micronucleus assays (MN) techniques. The material was chinese hamster's ovaryan cell line Cricetulus griseus and pills of glibenclamide and metformin. The chinese hamster's ovaryan cellline was grown in Ham's F10 supplemented with streptomycin penicillin 2%, L glutamina 0.5 % and bovine fetal serum 10 % (PBS) 20. Cells were grouped and treated with Glibenclamide 5 mg, Metformin 850 mg, Glibenclamide + Metformine 5/850 mg and the group control. The results were evaluated with the test of Genotoxic assessment. RESULTS: We observed a significant in crease (8,03 ± 0,17) in the treatment with the combined therapy regarding the group control and to the metformin respectively (6.91 ± 0.19; 6.94 ± 0.45), also there were a significant increase of micronucleas in the therapy combined of glibenclamide with metformin (14.44 ± 0.93), glibenclamide alone (10.18 ± 0.93) and metformin alone (7.10 ± 1.04) regarding to the group control (3.93 ± 0.46). CONCLUSION: There is genotoxic effect in the group of combinated therapy (Glibenclamide + Metformine) demonstrated using the of Sister Chromatid Exchanges (SCE) and Micronucleus assays (MN) techniques.

Revisión de la literatura sobre la toxicidad del sen / No disponible

El objetivo de este artículo es revisar la información de la literatura científica sobre la toxicidad de la hoja y el fruto de sen. Este análisis establece que: -No existen evidencias suficientes de que el uso crónico de sen tenga como consecuencia una alteración estructural y/o funcional de los nervios entéricos o del músculo liso intestinal. -No existe relación entre la administración a largo plazo de un extracto de sen y aparición de tumor es gastrointestinales o de otra índole en la rata. -El sen no es carcinogénico en ratas incluso después de una administración diaria durante dos años en dosis de hasta 300 mg/kg/día. -La evidencia de que se dispone en la actualidad no demuestra que exista un riesgo de genotoxicidad para los pacientes que consumen laxantes que contienen extractos de sen o senósidos (AU)

The aim of this article is to review the scientific literature about the toxicity of senna leaves and senna pods. This analysis stablish that: - There are not definitive evidences about the effects of the chronic uses of senna on the structural or functional alteration on the enteric nerves or on intestinal smooth muscle. -There is no relation between the long term administration of senna and gastrointestinal or another tumours in rats. - Senna is not carcinogenic on rats even after the daily administration, during two years, at doses of at least 300 mg/kg/day. -Nowadays, the evidences do not confirm the genotoxicity risk on patients consuming laxatives containing senna or sennosides (AU)

Toxicidad y teratogénesis por arsénico en aguas en el pez cebra (Danio rerio) / Toxicity and teratogenesis by arsenic in water in the zebra fish (Danio rerio)

El objetivo del trabajo fue estudiar los daños teratogénicos y la inducción de micronúcleos en células branquiales de peces cebra (Danio rerio) por presencia de arsénico en las aguas. Fueron mantenidos en aguas bicarbonatadas cálcicas magnésicas de un pozo de referencia y del pozo 'Zimapán 5', del Municipio Zimapán, Estado de Hidalgo, México. Este último, con un contenido de arsénico que varía de 0,395-0,630 mg/L. Para el estudio de genotoxi-cidad se evaluaron durante 180 días en 3 tratamientos: agua del pozo de referencia (control negativo, sin As), agua del pozo de referencia adicionada con 5,0 mg As (V)/L (control positivo), y en agua del pozo 'Zimapán 5', colocándose 65 especimenes por tratamiento. Después de 30 días hubo una disminución de As en el agua del control positivo de 1092,65 ppb (36,42 ppb/día) mientras en pescados hubo un incremento de 523,81 ppb (17,46 ppb/día). Para el agua del pozo 'Zimapán 5' hubo una disminución de 211,40 ppb (7,04 ppb/día), y en pescados hubo un incremento de 74,73 ppb (2,49 ppb/día). Este resultado pone de manifiesto el alto grado de bioacumulación de As en el pez, que en relación al control negativo muestra que es 2,54 veces mayor. En relación a la frecuencia de inducción de micronú-cleos en células branquiales, al final de los 180 días en el control negativo hubo una generación espontánea de 0,8 micronúcleos/1000 células, en el control positivo hubo una frecuencia de inducción de micronúcleos 163,5 veces mayor que en el control negativo, mientras que en los peces expuestos al agua del pozo 'Zimapán 5' fue 56,25 veces mayor con respecto al mismo. Estos resultados demuestran la genotoxicidad del As en Danio rerio. Para el estudio de teratogénesis, se colocó una hembra y un macho en apareamiento en las mismas condiciones de los tratamientos, obteniendo que a mayor concentra-ción de As en el agua mayor porcentaje de huevos no viables, menor porcentaje de huevos viables y de eclosión, mayor porcentaje de alevines recién eclosionados y juveniles con malformaciones, y menor porcentaje de juveniles sobrevivientes (AU)

The objective of this work was study the teratogenic damages and the induction of micronuclei in gill cells of zebra fish (Danio rerio). They was maintained in calcium-magnesium bicarbonated waters from a reference well and 'Zimapán 5' well, the latter with an arsenic (As) content ranging from 0.395 to 0.630 m/L. For the genotoxicity study the specimens were studied during 180 days in 3 separated lots; in reference well water (negative control), in reference water to which was added 5 mg/L As (V) (positive control); and in water from 'Zimapán 5' well, with specimens by treatment. In waters an As concentration diminution was observed with time, whereas in fish there was an increase. After 30 days there was an As diminution in water from positive control of 1092.65 ppb (36.42 ppb/day) whereas in fish it had increased to 523.81 ppb (17.46 ppb/day). For the water from 'Zimapán 5' well there was a diminution of 211.40 ppb (7.04 ppb/day), and in fish there was an increase of 74.73 ppb (2.49 ppb/day). This result indices the grade high of bioaccumulation of As in fish, in relation with negative control is 2.54 major. In relation to micronucleus frequency in gill cells, at the end of 180 days in the negative control there was a spontaneous generation of 0.8 micronuclei/1000 cells, in the positive control there was a micronucleus frequency 163.5 times greater than in negative control, whereas for the fish exposed to 'Zimapán 5' well water the micronucleus frequency was 56.25 times greater than with the negative control. Taken together these results demonstrate the genotoxicity to Danio rerio of As in the well water (AU)

Mutagenicidad en aguas de consumo mediante el test de reversión trp- en Escherichia coli / Mutagenicity in drinking water

Una de las principales fuentes de mutágenos ambientales se deriva de la cloración de las aguas de consumo público, ya que es bien conocido que el cloro reacciona con precursores del agua produciendo un grupo de compuestos que incluyen posibles carcinógenos humanos. Con el objeto de evaluar la actividad mutagénica de derivados orgánicos procedentes del agua de consumo de Madrid, nos planteamos utilizar el test de mutación reversa con Escherichia coli. Material y métodos: Se emplearon las cepas de Escherichia coli triptófano dependientes, WP2, WP2 uvrA – y WP2 uvrA – pKM 101. Cada experiencia se realizó con y sin activación metabólica (mezcla S9) y utilizando el método de incorporación en placa. Las muestras de agua fueron procesadas con el fin de concentrar los compuestos orgánicos clorados. Resultados y conclusiones: No hemos encontrado actividad mutagénica positiva con ninguna de las cepas de ensayo. Los mayores índices de mutación se obtuvieron con la cepa WP2 uvrA – pKM 101 y en las experiencias sin fracción microsomal (índice de mutación de 1,84) (AU)

Chlorinated drinking water is one of the primary sources of enviromental mutagens. Chlorine reacts with specific water precursors, creating a group of compounds with suspected human carcinogens. This study was conducted to investigate possible mutagenic activity in organic chlorinated compounds in the drinking water in Madrid using the Escherichia coli everse mutation assay. Materials and methods: Escherichia coli triptophan-dependent strains WP2, WP2 uvrA – and WP2 uvrA – pKM 101 were used in this study. Each test was performed with and without metabolic activation (S9 mix), using the plate incorporation method. The water samples were processed in order to concentrate the organic chlorinated compounds. Results and conclusions: No positive activity was found in any of the strains tested. The highest levels of mutagenicity appeared in the WP2 uvrA – pKM 101 strain and in the test where the microsome fraction was not used (index of mutation, 1.84) (AU)